组培 培养基等

植物组培培养基及其配制 培养基好比土壤，是组织培养中离体材料赖以生存和发展的基地。因此，在组织 培养基的各个环节中，应着重掌握培养基，了解它的组成和配制方法。 一、组成培养基的五类成分 目前，大多数培养基的成分是由无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质 和有机附加物等五类物质组成的。 1.无机营养物 无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成，大量元素中，氮源通常 有硝态氮或铵态氮，但在培养基中用硝态氮的较多，也有将硝态氮和铵态氮混合 使用的。磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供。钾是培养基中主要的阳离子，在 近代的培养基中，其数量有逐渐提高的趋势。而钙、钠、镁的需要则较少。培养 基所需的钠和氯化物， 由钙盐、 磷酸盐或微量营养物提供。 微量元素包括碘、 锰、 锌、钼、铜、钴和铁。培养基中的铁离子，大多以螯合铁的形式存在，即 FeSO4 与 Na2—EDTA(螯合剂)的混合。 2.碳源 培养的植物组织或细胞，它们的光合作用较弱。因此，需要在培养基中附加 一些碳水化合物以供需要。培养基中的碳水化合物通常是蔗糖。蔗糖除作为培养 基内的碳源和能源外，对维持培养基的渗透压也起重要作用。 3.维生素 在培养基中加入维生素，常有利于外植体的发育。培养基中的维生素属于 B 族维生素， 其中效果最佳的有维生素 B1、 维生素 B6、 生物素、 泛酸钙和肌醇等。 4.有机附加物 包括人工合成或天然的有机附加物。最常用的有酪朊水解物、酵母提取物、 椰子汁及各种氨基酸等。另外，琼脂也是最常用的有机附加物，它主要是作为培 养基的支持物，使培养基呈固体状态，以利于各种外植体的培养。 5.生长调节物质 常用的生长调节物质大致包括以下三类： (1)植物生长素类。如吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、2，4-二氯苯氧乙酸(2， 4-D)。 (2)细胞分裂素。如玉米素(Zt)、6-苄基嘌呤(6-BA 或 BAP)和激动素(Kt)。 (3)赤霉素。组织培养中使用的赤霉素只有一种，即赤霉酸(GA3)。 二、常用培养基配方及其特点 1.常用培养基配方 组织培养是否成功，在很大程度上取决于对培养基的选择。不同培养基有不 同特点，适合于不同的植物种类和接种材料。开展组织培养活动时，应对各种培 养基进行了解和分析，以便能从中选择使用。下面介绍组织培养几种常用培养基 的配方见表 9－1。 培养基中的激素种类和数量，随着不同培养阶段和不同材料而有变化，因此 各配方中均不列入。 2.几种常用培养基的特点 (1) MS 培养基。

MS 培养基是目前普遍使用的培养基。它有较高的无机盐浓度， 对保证组织生长所需的矿质营养和加速愈伤组织的生长十分有利。 由于配方中的 离子浓度高，在配制、贮存、消毒等过程中，即使有些成分略有出入，也不致影 响离子间的平衡。MS 固体培养基可用来诱导愈伤组织，或用于胚、茎段、茎尖 1