植物组织培养技术
植物组织培养技术
植物组织培养技术
上世纪30年代white首次由番茄根建立了第一个活跃生长的无性繁殖系,验证了l902年Haberlandt提出的植物细胞全能性的理论。所谓植物细胞全能性就是每个植物细胞就像一粒种子,在适宜条件下具有发育成完整植株的潜力。20世纪50年代——诱导培养银胶菊愈伤组织得到天然橡胶从胡萝卜体细胞培养出完整植株。从曼佗罗花药培养出单倍体植物从而证实了植物细胞“全能性”的存在,为后来植物细胞工程及其在各领域中的应用奠定了基础。 运用组织培养方法可以在比较简单易观察的条件下研究细胞、组织或器官的繁殖、生长和分化,以及各种外界因素对它们的影响,从而为解决农业生产和药物生产中的某些问题开辟了广阔的前景。
6. 技术流程
广义概念: 在无菌条件下,将离体的植物器官(如根尖、茎尖、叶、花、未成熟的果实、种子等)、组织(如形成层、花药组织、胚乳、皮层等)、细胞(如体细胞、生殖细胞等)、胚胎(如成熟和未成熟的胚)、原生质体(如脱壁后仍具有生活力的原生质体),培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培长养条件,诱发产生愈伤组织,或潜伏芽等,或成完整的植株,统称为植物组织培养
狭义概念: 利用植物外植体在固体培养基上培养,获得愈伤组织或完整植株,即为植物组织培养,也称离体培养或外植体培养。根据外植体来源和培养对象的不同,又分为植株培养、胚胎培养、器官培养、组织培养、原生质体培养等
贝母——原来繁殖率非常低,而用组织培养分化出的三个月左右的鳞茎,其大小就相当于用种子繁殖二年生的鳞茎
罗汉果——通常用压蔓繁殖,繁殖系数低、易退化且需2年以上才能结果,再生体系建成后,其组培苗当年座果率就达80%以上
从60年代开始的我国中药离体培养和试管繁殖研究,到目前为止已有200多种药用植物经离体培养获得试管植株,如贝母、百合、黄芩、红豆杉、桔梗等。其中已有相当一部分药材可利用试管繁殖技术繁殖培育种苗,如罗汉果、苦丁茶、芦荟、怀地黄、枸杞、金线莲等。
化学合成培养基大致由6种成分组成:(1)糖类(2)多种无机盐类(3)微量元素(4)氨基酸、酰胺、嘌呤(5)维生素(6)生长素。此外,有些培养基还可添加天然的汁液,如椰子汁、酵母提取液、水解酪蛋白、麦芽浸出液等,培养基中如加入0.5~1%的琼脂即为静止培养的固体培养基,否则为悬浮培养的液体培养。不同植物材料常需要改变配方如维持生长和诱导细胞分裂分化的培养基配方就不同,因此配方的种类很多。目前以MS(Murashige
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