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常规细胞培养方法

细胞活力分析 改编自Freshney, R.I.,1994。动物细胞培养：基本技术手册，第3版，Wiley-Liss,纽约，美国。

细胞培养方法介绍

细胞活力分析可以测定细胞悬液中存活细胞的百分比。一般通过染料排除的染色方法实现，即具有完整细胞膜的细胞能够将染料排除在外从而不被染色，而不具备完整细胞膜的细胞则能够吸收染料而被染色。

1.制备用于分析的细胞悬液(大约10 6个细胞/毫升)。 2.制备用0.4%台盼蓝溶液(SV30084.01) 1:1稀释的细胞悬液。 3.将稀释液加入血球计数板的计数池中

用于排除染色法的染料通常选择台盼蓝，但是赤藓红和萘黑也常被使用。吸收染料的染色方法也可以用于测定细胞活力。这种情况下，染料被活细胞正常吸收，而死细胞则不会。例如双乙酰荧光素就是这类染色方法中所使用的染料。台盼蓝染色的方法应用较为广泛，操作方法如下所述：

(见血球计数板)。 4.静置1-2分钟(时间不要太长，否则活细胞也会死亡并开始

吸收染料)。 5.用血球计数板计算被染色的细胞数和总细胞数。 6.未被染色的细胞百分比则代表了活细胞的百分比。

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