实时定量PCR的原理及其在植物病理学研究中的应用

实时定量PCR(Real-time quantitative)是一种利用荧光信号实时监测每个循环的扩增产物,从而实现对模板进行定量分析的新技术。它具有快速、灵敏、精确等优点。该技术在分子诊断、分子生物学研究、动植物检疫以及食品安全检测等方面有广泛的应用。本文综述了实时定量PCR的原理、影响因素及其在植物病理学研究中的应用。

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粗扬铱第 3卷第6 20) 3期( 7 0 P ANT P OT C O L R E TI N Vo. 3No 6 ( 0 7 13 . 2 0 ) 13 2

关文献报道,田蚜虫还有棉蚜 ( hs os p i、烟 Ap i g sy i) 禾谷缢管蚜 ( h p ls h m a i、粉大尾蚜 R o aoi u p d )桃 p

作,建立新的农业生态体系,以有效地控制病源基地和介体蚜虫,防治病毒病流行,达到持久控害的目的。

( ao trs my d l)也为害烟草和传播病毒 Hy lpeu g ai, a 病,由于条件地限制,没有鉴定到棉蚜、禾谷缢管蚜、 桃粉大尾蚜,知其是否能够在烟草上定殖,而传不从

参考文献 []刘爱芝, 1李世功,雪.河南省烟草病毒病的介体蚜虫种类及王与发病关系的研究 _] J.华北农学报,9 9 4 1:15 1. 1 9,1 () 1—17 []张广学, 2李铁森.中国经济昆虫志 (5:同翅目蚜虫类[ . 2) M] 北京:科学出版社,18 . 93

播烟草病毒。烟草病毒病的发生流行与各种因素有关(烟草发育阶段、耕作制度、物布局、气等 )特作天, 别是与介体蚜虫有很大关系,好轮作,搞不与油菜混

实时定量 P的原理及其 (病理学研究中的应用 吴静,吴茂森,何晨阳 (} t国农业科学院植物保护研究所,北京 10 9 ) 1 00 4

摘要实时定量 P R( eli uni t e是一种利用荧光信号实时监测每个循环的扩增产物, C R a t q a tai ) -me t v从而实现对模板进行定量分析的新技术。它具有快速、灵敏、精确等优点。该技术在分子诊断、分子生物学研究、动植物检疫以及食 品安全检测等方面有广泛的应用。本文综述了实时定量 P R的原理、响因素及其在植物病理学研究中的应用。 C影 关键词实时定量 P R; C值;定量分析;应用 C t 中图分类号 Q 7

Pr n i e fr a— i e q a tt tv i c pls o e ltm u n ia i e PCR n t p i a i n i a a h l g a d isa plc to n pl ntp t o o y W uJn ig。 W u M a s n o e。 HeC

h n a g e yn

( n t ue f P a t r t t n, A Isi t o l n P o ci C AS B iig 1 0 9, h n ) t e o, e n 0 0 4 C ia j Ab t a t Re lt u n i tv CR ( o y r s h i e c i n sa n w t o s d t n lz h e lt o— sr c a— i q a t a i e P。 me t p lme a ec an r a t )i e me h d u e O a a y et et mp a ec n- o c n r t n b n t rn h l o e c n i n l u ig e c mp iia in c ce .B n f so h s t c n lg v rc n e ta i y mo i i g t e f r s e tsg a rn a h a l c t y ls e e i f i e h o o y o e o— o o u d f o t t v n i n l n si cu eh g e stvt e t a e l d i h s n i i o o n i y,lr ed n m i r n ea d a c r t u n i c t n I d l s d i lc lr a g y a c a g n c u a eq a t ia i . ti wi e y u e n moe u a f o s

d a n s is ig o t,mo e u a i lg e e r h a d a i l n ln u r n i e t. I h sr v e,t ep i cp e,k y f c c lc lrb o o y r s a c n n ma d p a tq a a tn,e c n t i e iw h rn i ls e a— a t r ft i me h d a d isa p ia i n i ln a h l g r ic s e . o s o h s t o n t p l t p a tp t o o y we ed s u s d c o n Ke r s r a—i u n i t ePC CtVa u; q a t a i e a a y i; a pi a in y wo d e l me q a t a i R; t t v l e u n i tv n l ss p l t t c o

2 O世纪 8 O年代出现的 P R技术是上世纪最伟 C大的发明之一,的发明者凯利 穆利斯 ( r它 Kay Mul ) ls因此获得了 19 i 9 3年度诺贝尔化学奖[。在 1一近2 O年的时间里, C因其灵敏、异的特点已成 PR特为分子

生物学实验室和医院临床分子诊断的核酸分

是普通 P R不能胜任的。竞争性定量 P R( o— C C cr n p t ieq a t aie是一种可以进行定量检测的技 eiv u n i t ) t t v

术。这种技术是通过在反应中加入已知量的竞争物 (o ei r,应结束后通过比较目的产物与竞争 cmpto)反 t物扩增产物的比值进行定量。但这种技术因受扩增后期反应组分消耗等因素影响而致定量精确度降 低,仍不能满足定量、特异、速地检测核酸分子的快

子定性检测技术。但是在进行病毒检测、因表达基量分析等试验中必须对目的核酸做出定量检测,这 收稿日期: 20—0— 9 0 7 3 0修订日期: 2 0—0—1 07 4 0

*通讯作者

T lO O 29 0 3 E malw masn omalcr e:1~68 6 6; i u oe@h t i o: . n

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