植物组织培养笔记2
植物组织培养笔记
试验器具的清洗、烘干、包扎、灭菌
一、必要性:
1、在植物组织培养中,需要将实验所用的玻璃器具清洗干净,植物离体细胞组织培养对任何玻璃器皿残留的毒性物质都十分敏感,可能会影响植物细胞的生长和分化。
2、某些化学物质仅0.01ug/L,就会对细胞产生毒性作用,因此植物组织培养试验中对培养皿的清洗和消毒是否彻底,会直接影响植物组织培养的实验结果。
二、灭菌试剂、仪器:
1、常用试剂
(1)、铬酸洗液:用5-10g K2Cr2O7溶于少量热水中,冷却后徐徐加入100ml浓硫酸,搅动得暗红色洗液,冷后注入干燥试剂瓶中盖严备用。
(2)、碱性高锰酸钾洗液:取4g K2MnO4溶于少量水后,加入100ml10%的NaOH溶液混匀后装瓶备用。洗液呈紫红色。
表1-1洗液配方
药品
重铬酸钾g
浓硫酸ml
蒸馏水ml 强液 63 1000 200 次强液 120 200 1000 弱液 100 100 1000
2、灭菌仪器:高压灭菌锅、电热烘箱
三、玻璃器皿的灭菌及清洗:
1、新购买的玻璃仪器的清洗:使用前,将器皿放入5%HCL溶液中浸泡几个小时以中和游离的碱性物质,最后用流水冲洗干净。对容量较大的器皿,如大烧瓶、量筒等,洗净后注入浓盐酸少许,转动容器使其内部表面均沾有浓盐酸,数分钟后倾去浓盐酸,再以流水冲洗干净倒置于洗涤架上晾干,即可使用。
2、旧玻璃器皿的清洗:

1、浸泡:先用自来水简单浸泡、涮洗,后用5%的HCL浸泡过夜。
2、刷洗:用毛刷(试管刷)沾上优质的洗洁精进行刷洗,要注意
清洗瓶角等部位,不能留有死角。
3、酸洗:以重铬酸钾、浓硫酸和蒸馏水配制成洗液,对玻璃
器皿反复冲洗,可以将刷洗不掉的杂质通过洗液的强氧化作
用除掉。
4、冲洗:刷洗和洗液浸泡后都必须用水充分冲洗,不久任何残迹,
然后用蒸馏水漂洗2-3次,晾干备用。
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