四、胚胎工程：早期胚胎或配子水平

（一）体内受精和早期胚胎发育：

1、精子的发生：睾丸的曲细精管内，初情期开始

变形：细胞核—精子头，高尔基体—顶体，中心体—尾，线粒体—尾的基部的线粒体鞘，

其他物质—原生质滴向后脱落

2、卵子的发生：卵巢及输卵管

胎儿性别分化后：卵原细胞有丝分裂，并变成初级卵母细胞，被卵泡细胞包围形成卵泡

卵泡的形成和在卵巢内的储备在出生前（胎儿时期完成）

初情期后：初级卵母细胞——次级卵母细胞和第一极体——减二中期停——卵子、极体

马狗排卵 猪牛羊排卵 受精

卵子是否受精的标志：卵黄膜和透明带的间隙可以观察到两个极体

3、受精：输卵管内完成

（1）精子获能

（2）卵子的准备：达到减数第二次分裂中期

（3）受精：

顶体反应，释放顶体内酶，溶解卵丘细胞之间的物质，穿越放射冠、透明带，（精子触及卵黄膜的瞬间）透明带反应，精子外膜和卵黄膜相互融合（标志着精子入卵），卵黄膜的封闭作用&精子尾部脱离形成雄原核，卵子减二完成，排出第二极体，形成雌原核，比雄原核小，核融合（标志受精卵的产生）

防止多精入卵：透明带反应 卵黄膜的封闭作用

4、胚胎发育：卵裂期（透明带内，有丝分裂，胚胎的总体体积并不增加，或略有减小）

（1）桑椹胚：细胞数目32个，全能细胞

（2）囊 胚：开始出现分化，内细胞团（胎儿）；囊胚腔；滋养层细胞（胎膜胎盘）

孵化：透明带破裂，胚胎伸展出来

（3）原肠胚：内细胞团—外胚层、内胚层、中胚层，原肠腔

（二）体外：

1、体外受精：

（1）卵母细胞的采集：实验动物、猪、羊—促性腺激素处理超数排卵，输卵管中冲取

大牛：屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞；活体动物的卵巢中吸取卵母细胞 人工培养至减二中期

（2）精子的采集和获能：假阴道法、手握法、电刺激法

获能处理：培养法（人工配制的获能液）；化学诱导法（一定浓度的肝素或钙离子载体溶液）

（3）受精：获能溶液或专用的受精溶液

2、胚胎的早期培养：

无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清

向受体移植或冷冻保存

3、胚胎移植：

（1）意义：充分发挥雌性优良个体的繁殖能力；大大缩短了供体本身的繁殖周期；良种畜群迅速扩大，加速了育种工作和品种改良；不受时间地域限制，节省购买种畜费用；胚胎冷冻保存品种资源和濒危物种

（2）基本程序：

①对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种。并用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。 ②同种优秀公牛配种或人工授精。

③把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来(冲卵)，胚胎进行质量检查，向受体移植或放入液氮中保存。 ④对受体母牛进行是否妊娠的检查。

（3）生理学基础：