D二聚体的检测方法和临床应用

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D-二聚体检测的方法及其临床应用

D-二聚体(D-Dimer,D-D)是交朕纤维蛋白(Fb)特异的降解产物,它的生成或增高反映了凝血和纤溶系统的激活。在全血或血浆中,采用针对D-D的抗体可以很容易地检测D-D含量。近10年来,已建立了多种有价值的D-D的检测方法。早在80年代末90年代初期,人们发现D-D对临床上疑诊为静脉血栓形成(venous thrombo-embolism,VTE)的患者高度敏感,但不特异。在这些患者中,当血浆D-D浓度低于:某一临界值(通常为500μg/l)时,其阴性预测值大于90%,由此可以作为排除VTE的筛选试验。近年来,随着方法学的不断进步,建立多种适用于急诊的简单快速的敏感方法,D-D检测的临床应用越来越广泛。大量研究已经亢分证实了D-D在排除诊断下肢深静脉血栓形成(deepvein thromboembolism,DVT)和肺栓塞(pulmonary embolism,PE)中的应用价值,已将其作为首选筛选指标之一。最近,D-D检测的应用巳深入到弥散性血管内凝血(DlC)、心血管疾病、激素替代治疗、恶性肿瘤以及抗凝治疗领域。

一、D-D的生成

在各种病理和生理状态下,凝血系统的激活导致Fb的生成,而Fb的生成又可激活纤溶系统,引起纤溶酶(plasmin,PL)的生成和Fb的降解。在交联Fb的降解过程中,生成了一系列的特异降解产物,其中包括D-D(D-Dimer)(图1A,1B)。

凝血系统的激活导致凝血酶生成,凝血酶结合于纤维蛋白原的中央结构域,释放纤维蛋白肽A(FPA)和纤维蛋白肽B(FPB),生成纤维蛋白单体和多聚体。在活化FXIII的作用下,生成交联的纤维蛋白。纤溶酶降解交联纤维蛋白,生成多种交联的纤维蛋白降解产物(FbDPs),其中包括D-D和其它的片段。

二、D-D的检测方法

D-D的检测方法有多种,主要是基于胶乳凝集原理的定性或半定量试验以及基于ELISA原理的定量测定,也有—些方法采用免疫浊度原理或免疫荧光原理。胶乳法灵敏度较低,而经典ELISA法操作费时,都不适合急诊使用。现在已经发展了数种快速的、叮检测单份标本的高灵敏度检测方法。其中应用最广泛、得到临床研究认可的快速检测方法主要有两种:一种是在全血小进行的,只需2分钟就可得到定性结果的试验(自身红细胞凝集,SimpliRed, Agen;金标法Simplify,Agen);另一种是快速ELISA(VIDASD-D,Biomerieux)。两种快速D-D检测方法与经典检测方法的比较见表1。其他一些快速检测法,无论是基于ELISA原理或是胶乳凝集原理,在推荐用于诊断可疑VTE或其他血栓性疾病前,应进行全面的临床应用评估。

对于用于排除诊断VTE的D-D检测方法而言,下列几个指标非常重要:①敏感性;②特异性;③阴性预测值(NPV):即当D-D水平低于临界值或为阴性时,患者确实不患VTE的可能性;④阳性预测值(PPV):即当D-D水平高于临界值或为阳性时,患者患VTE的可能性。其中D-D检测方法对VTE的敏感性和NPV是评价该方法至关重要的指标。以下简要介绍几种常用方法的原理和检测特性,比较各种方法的性能,并就目前在D-D检测方法学上的局限性作一分析。

(一) 胶乳凝集法

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